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產(chǎn)品課堂

伯樂Mini-sub cell GT核酸電泳儀水平電泳槽上樣操作


要注意以下幾點(diǎn):
1、 用移液槍將樣品加至點(diǎn)樣孔。每孔點(diǎn)樣的體積一般少于25ul,一般情況下,0.5cm寬的梳子可加0.5μg的DNA量,加樣量的多少依據(jù)加樣孔的大小及DNA中片段的數(shù)量和大小而定。當(dāng)加樣孔大時(shí),樣品上樣量應(yīng)相應(yīng)加大,否則會(huì)造成條帶淺甚至辯認(rèn)不清;反之則應(yīng)適當(dāng)減少加樣量,但是上樣量過多會(huì)造成加樣孔超載,從而導(dǎo)致拖尾和彌散,對于較大的DNA此現(xiàn)象更明顯。

2、吸取每一個(gè)樣品時(shí),操作要穩(wěn)當(dāng)且細(xì)心。緩慢使樣品均勻沉降于樣品孔底部。注意不要使槍頭或針頭刺破膠孔底部。
3、 常加一定量的蔗糖來增加樣品的濃度,以使每個(gè)樣品停留在各自的點(diǎn)樣孔中,以免樣品飄出。
4、 在樣品中加入水溶性的陰離子追蹤染料(如溴酚藍(lán)),用以看出樣品移動(dòng)的距離。
5、 在一個(gè)或幾個(gè)孔中加入標(biāo)準(zhǔn)分子質(zhì)量樣品,電泳結(jié)束后,根據(jù)已知分子質(zhì)量的帶的相應(yīng)位置可用來做出標(biāo)準(zhǔn)曲線。